Ифа что это такое

Иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA). Суть, принцип метода и этапы исследования. Анализ на антитела, классы антител, иммунный комплекс.



Сайт предоставляет справочную информацию. Адекватная диагностика и лечение болезни возможны под наблюдением добросовестного врача.

Оглавление:

Компоненты иммуноферментного анализа – иммунная реакция и ферментативная реакция

Иммуноферментный анализ, как видно из названия, состоит из двух разных компонентов – иммунной реакции и ферментативной реакции. Иммунная реакция производит связывание биологических молекул, элементов клетки или микроорганизма, которые собственно и пытаются обнаружить, а ферментная реакция позволяет увидеть и измерить результат иммунологической реакции. То есть иммунная реакция – это часть комплексной методики, которая собственно обнаруживает искомый микроб. А ферментная реакция – это та часть комплексной методики, которая позволяет перевести результат иммунной реакции в форму, видимую глазом, и доступную для измерения рутинными химическими методиками. Исходя из такой структуры метода иммуноферментного анализа, разберем обе его части по отдельности.

Иммунная реакция, что это? Что такое антитело, антиген?

Что такое иммунная реакция? Что такое антиген?

В первую очередь разберем, что такое иммунные реакции. Иммунные реакции – это специфические реакции связывания антигена с антителом с образованием иммунного комплекса. Что это значит? На поверхности каждой клетки любого организма имеются особые структуры, которые называются антигены. Антигены в целом – это молекулы, которые несут информацию о клетке (подобно информации на бейдже у человека, где указываются основные данные этого человека).

А что представляет собой антитело?



При сигнале «чужой» ситуация разворачивается иначе. Антитело не разрывает связь с антигеном, а наоборот, посылая специфические сигналы, вызывает «подкрепление». Биологически это означает, что другие антитела, находящиеся в другой части клетки, начинают перемещаться к участку, откуда идет сигнал опасности, и также образуют связь между собой и пойманным антигеном. В конце концов, антиген оказывается, окружен со всех сторон и прочно привязан.Такой комплекс антиген + антитело называется иммунный комплекс. С этого момента начинается утилизация антигена. Но сейчас подробности процесса нейтрализации антигена нас не интересуют.

Антитела – это белковые структуры, которые, соответственно, имеют химическое название, которое и используется как синоним слова антитела. Итак, антитела = иммуноглобулины.

Ферментативная реакция

Перейдем к рассмотрению ферментативной реакции в работе метода иммуноферментного анализа.

Метод колориметрии – суть и принцип

Прямой иммуноферментный анализ – этапы проведения

Непрямой иммуноферментный анализ – этапы проведения

Так же как и для прямого иммуноферментного анализа производится забор биологического материала – кровь, соскобы, мазки. Исследуемый биологический материал вносят в лунки и оставляют наминут для приклеивания антигенов к поверхности лунок. Затем в лунки вносят немеченые антитела к антигенам и оставляют на промежуток времени (1-5 часов), чтобы антитела связались со «своими» антигенами и образовали иммунный комплекс (первый этап). После чего удаляют «лишние», не связавшиеся антитела, путем выливания содержимого лунок. Производят промывку специальным раствором для полного удаления всех не связавшихся антител.

После чего берут вторые антитела – меченые, добавляют в лунки и опять оставляют на некоторое время –минут (второй этап). За это время меченые антитела связываются с первыми – не мечеными и образуют комплекс – антитело + антитело + антиген. Однако и меченые, и не меченые антитела вносятся в лунки в избытке. Поэтому нужно опять удалить «лишние», уже меченые антитела, которые не связались с немечеными антителами. Для этого повторяют процедуру выливания содержимого лунок и промывки специальным раствором.



После чего вносят фермент, осуществляющий реакцию превращения «метки» в окрашенное вещество. Окраска развивается в течение 5-30 минут. Затем проводят колориметрию и вычисляют концентрацию окрашенного вещества. Поскольку концентрация окрашенного вещества равна концентрации меченых антител, а концентрация меченых равна концентрации немеченых антител, которая, в свою очередь равна концентрации антигена. Таким образом, получаем концентрацию выявляемого антигена.

Такой двойной контроль в виде использования двух видов антител позволил повысить чувствительность и специфичность метода иммуноферментного анализа. Несмотря на удлинение времени проведения анализа и включение дополнительных этапов, эти потери компенсируются точностью результата. Именно поэтому в настоящее время подавляющее большинство методик иммуноферментного анализа – это непрямой иммуноферментный анализ.

Какие заболевания выявляют методом иммуноферментной диагностики?

В таблице приведен далеко не полный перечень анализов (только наиболее распространенные), выполняемых с помощью иммуноферментного анализа. Привести же весь список не представляется возможным, поскольку он будет очень большим и постоянно пополняющимся. Помимо лабораторной диагностики метод иммуноферментного анализа широко используется в научных исследованиях.

Автор: Наседкина А.К.



Рекомендуем прочесть:

Комментировать или поделиться опытом:

Копирование информации без гиперссылки на источник запрещено.

Регистрация

Вход в профиль

Регистрация

Это займет у Вас меньше минуты

Вход в профиль

Войдите при помощи профиля в социальной сети или ранее зарегистрированного профиля на сайте

Источник: http://www.polismed.com/articles-immunofermentnyjj-analiz-ifa-elisa-sut-princip-metoda-i-ehtapy-issledovanija.html

ИФА-диагностика: в чем суть, определение антител, как проводят и при каких болезнях эффективна?

ИФА (иммуноферментный анализ, ELISA – англ.) вошел в жизнь практической медицины еще где-то в 60-х прошлого столетия. Первоначальной его задачей были гистологические исследования в научных целях, которые сводились к поиску и идентификации антигенной структуры клеток живого организма.



В основе метода ИФА лежит взаимодействие специфических антител (АТ) и родственных антигенов (АГ) с образованием комплекса «антиген – антитело», который выявляют при помощи фермента. Этот факт натолкнул ученых на мысль, что метод может быть использован в диагностических целях для выявления специфических иммуноглобулинов различных классов, участвующих в иммунном ответе на ту или иную инфекцию. И это был прорыв в клинической лабораторной диагностике!

Активно использоваться метод начал только в начале 80-х и то, в основном, в специализированных учреждениях. Первыми иммуноферментными анализаторами были снабжены центры и станции переливания крови, инфекционные и венерологические стационары, поскольку рожденный на африканском континенте, появившийся на горизонте у нас и тут же примкнувший к «старым» инфекциям грозный СПИД, требовал незамедлительных мер диагностики и поиска лечебных препаратов, воздействующих на него.

Область применения метода ИФА

Возможности иммуноферментного анализа поистине обширны. Теперь и представить себе трудно, как можно обойтись без подобных исследований, применяемых буквально во всех отраслях медицины. Кажется, что может сделать ИФА в онкологии? Оказывается, может. И многое. Способность анализа находить маркеры, свойственные некоторым видам злокачественных новообразований, лежит в основе раннего выявления опухоли, когда другим способом она еще не определяется из-за своих небольших размеров.

Современная клиническая лабораторная диагностика (КДЛ), кроме онкомаркеров, располагает значительным арсеналом панелей для ИФА и использует их для диагностики различных патологических состояний (инфекционных процессов, гормональных нарушений) и мониторинга фармацевтических лечебных препаратов с целью выявления их влияния на организм больного и, кстати, не только человека. В настоящее время иммуноферментный анализ широко используется и в ветеринарной службе, ведь «братья наши меньшие» тоже подвержены многим заболеваниям, от которых, порой, очень сильно страдают.

Таким образом, ИФА, благодаря своей чувствительности и специфичности, по образцу крови, взятому из вены, может определить:


  • Гормональный статус (гормоны щитовидной железы и надпочечников, половые гормоны);
  • Присутствие вирусной и бактериальной инфекции (ВИЧ, гепатиты В и С, хламидиоз, сифилис, уреа- и микоплазмоз, герпетическая и TORCH-инфекции, а также многие другие болезни, вызванные патогенными микроорганизмами);
  • Следы жизнедеятельности микроорганизмов, возбудивших инфекционный процесс, который благополучно закончился и перешел в стадию формирования иммунного ответа на этот возбудитель. Такие следы, то есть, антитела, во многих случаях остаются циркулировать в крови пожизненно, чем защищают человека от повторного заражения.

В чем суть ИФА?

Иммуноферментный метод, позволяет определить не только присутствие самого возбудителя (качественный анализ), но и его количественное содержание в сыворотке крови больного.

Вирусовая или бактериальная доза существенно влияет на течение инфекционного процесса и его исход, поэтому количественному анализу отведена не последняя роль в диагностике и лечении заболеваний в различных формах и стадиях.

Однако зная иммуноферментные исследования, как метод ИФА, мы даже не задумываемся, как же ему удается охватить такой широкий круг микроорганизмов, населяющих нашу планету, многие из которых несут прямую угрозу здоровью и жизни человека и животных. А дело в том, что ИФА имеет много вариантов (неконкурентный и конкурентный – прямой и непрямой), каждый из которых решает свою задачу и, таким образом, позволяет проводить целенаправленный поиск.

Для выявления иммуноглобулинов того или иного класса используется традиционная 96-луночная полистироловая панель (планшет), в лунках которой в твердой фазе сосредоточены сорбированные рекомбинантные белки. Попавшие в лунку с сывороткой крови антитела или антигены, находят «знакомый» объект и образуют с ним комплекс (АГ – АТ), который, закрепившись ферментным конъюгатом, при считывании результатов проявится изменением окраски лунки.

Иммуноферментный анализ проводится на тест-системах определенной специфичности, изготовленных в специальных лабораториях и укомплектованными всеми необходимыми реагирующими компонентами. Исследования можно проводить с помощью промывных аппаратов («вошеров») и считывающих спектрофотометров, где большей частью задействован ручной труд. На полных автоматах, освобождающих лаборанта от монотонного закапывания, промывания и прочих рутинных дел, конечно, работать быстрее и удобнее, но не все лаборатории могут позволить себе такую роскошь и продолжают работать по старинке – на полуавтоматах.

Интерпретация результатов ИФА находится в компетенции врача лабораторной диагностики, при этом обязательно берется в расчет и присущее практически всем иммунохимическим реакциям свойство давать ложноположительные или ложноотрицательные ответы.

Видео: современное проведение иммуноферментного анализа

Результаты ИФА на примере сифилиса

Иммуноферментный анализ подходит для выявления всех форм сифилиса, а, кроме этого, применяется в проведении скрининговых исследований. Для проведения анализа используют венозную кровь пациента, взятую натощак. В работе используются планшеты с определенной специфичностью (АТ классов А, М, G) или суммарные антитела.

Учитывая то, что АТ при сифилисе продуцируются в конкретной последовательности, ИФА может легко ответить на вопрос, когда произошло заражение и в какой стадии находится процесс, а расшифровка полученных результатов может быть представлена в следующем виде:

  • IgM указывают на продолжительность инфекционного процесса (могут появляться при обострении хронических воспалительных заболеваний);
  • IgA констатируют, что заражение случилось более месяца назад;
  • IgG свидетельствуют о том, что инфекция находится в самом разгаре или о проведенном недавно лечении, что легко выясняется при сборе анамнеза.

При проведении анализа на сифилис, лунки с отрицательным ответом (и отрицательный контроль) останутся бесцветными, в то время как положительный результат (как и положительный контроль) даст ярко-желтое окрашивание за счет изменения цвета хромогена, добавленного в ходе исследования. Однако интенсивность окраски не всегда совпадает с контролем, то есть, она может быть немного бледнее или слегка желтоватой. Это сомнительные результаты, которые, как правило, подлежат повторному исследованию с обязательным учетом количественных показателей, полученных на спектрофотометре, но в целом, окраска находится в прямо пропорциональной зависимости от количества иммунных комплексов (связанные между собой АГ и АТ).

Самый волнительный из иммуноферментных анализов — ИФА на ВИЧ

Анализ на ВИЧ, пожалуй, больше других интересен широкому кругу населения, ведь пока нельзя с уверенностью утверждать, что исчезли многие социальные проблемы (проституция, наркомания и др.). К сожалению, ВИЧ затрагивает не только эти слои человеческого общества, заразиться можно при различных обстоятельствах, не связанных с половой распущенностью или приемом наркотиков. Но коль возникла необходимость обследования на ВИЧ, то бояться не следует, что все вокруг узнают о посещении такой лаборатории. Сейчас ВИЧ-инфицированные люди защищены законом, а сомневающиеся могут обратиться в анонимные кабинеты, где можно решить проблему, не боясь огласки и осуждения.

Иммуноферментный метод, применяемый для диагностики ВИЧ инфекции, относится к первостепенным стандартным исследованиям, которые, однако, требуют особых условий, поскольку тема очень деликатная.



ИФА на ВИЧ имеет смысл проводить после полового контакта, переливания крови, других медицинских манипуляций, предполагающих заражение, и по окончании инкубационного периода («серонегативное окно»), но следует учитывать, что этот промежуток времени не является постоянным. Он может закончиться черездней, а может продолжаться до полугода, поэтому средним значением принято считать интервал от 45 до 90 дней. На ВИЧ кровь сдают так же, как и на другие инфекции – из вены на голодный желудок. Результаты будут готовы в зависимости от накопления материала в лаборатории и ее загруженности (от 2 до 10 дней), хотя чаще всего лаборатории обеспечивают получение ответа в тот же день или на следующий.

Что можно ожидать от результатов на ВИЧ?

ИФА на ВИЧ-инфекцию определяет антитела к двум разновидностям вируса: ВИЧ-1 (более распространенный в России и других странах Европы и Азии) и ВИЧ-2 (встречающийся чаще на территории Западной Африки).

Задачей ИФА ВИЧ является поиск АТ класса G, которые выявляются на всех тест-системах, но в более позднем периоде, и АТ классов А и М, выявляемых на рекомбинантных тест-наборах нового поколения, позволяющих найти антитела на самых ранних стадиях (инкубационный период – «серонегативное окно»). От ИФА можно ожидать следующие варианты ответов:

  1. Первичный положительный результат: кровь подлежит перепроверке на тест-системе такого же типа, но по возможности другой серии и другим человеком (лаборантом);
  2. Повторный (+) предполагает новый забор крови у пациента с исследованием ее подобно первичному анализу;
  3. Очередной положительный результат подлежит референтному анализу, при котором используются высокоспецифичные тест-наборы (2-3 шт.);
  4. Положительный результат в обеих (или в трех) системах направляется на иммуноблотинг (тот же ИФА, но выполненный в индивидуальном порядке на тест наборах особо высокой специфичности).

Заключение о ВИЧ инфицировании выносится только на основании иммуноблотинга. Проводится беседа с инфицированным в условиях полной конфиденциальности. Разглашение медицинской тайны в России, как, впрочем, и в других странах, подлежит уголовному наказанию.

ИФА находит хламидию, цитомегаловирус и даже паразитов

Анализы на хламидии и цитомегаловирус иммуноферментным методом также обрели особую популярность, ввиду того, что позволяют определить время заражения, стадию заболевания и эффективность лечебных мероприятий.



При внедрении хламидии тоже можно наблюдать появление антител различных классов в разных фазах патологического состояния, вызванного инфекционным агентом:

  • IgM могут обнаружиться уже дней через семь после заражения;
  • IgA говорят о том, что инфекция в организме живет уже более месяца;
  • IgG подтверждают диагноз хламидиоза, помогает следить за лечением и определить его действенность. Следует заметить, что антитела класса G остаются и циркулируют в организме независимо от давности болезни, поэтому для правильной расшифровки анализа нужно принимать во внимание референтные значения (нормы), которые, кстати, для каждой КДЛ свои: с учетом марки тест-системы и специфичности реагентов, входящих в набор. Значения нормы вписываются в бланк рядом с результатом ИФА.

Что касается цитомегаловируса (ЦМВ), то здесь несколько иначе: антитела класса М появляются приблизительно через месяц-полтора, то есть, положительным результат (IgM+) становится в фазе первичного инфицирования или при реактивации скрытой инфекции и остается таковым от 4 месяцев до полугода.

Наличие АТ класса G характерно для начала первичной острой инфекции или реинфекции. Анализ констатирует, что вирус имеет место, однако информации, в какой стадии находится инфекционный процесс — не дает. Между тем, определение нормы титра IgG тоже вызывает затруднения, так как она целиком зависит от иммунного статуса конкретного человека, который, впрочем, устанавливается выявлением иммуноглобулинов класса G. Учитывая такое поведение антител, при диагностике ЦМВИ возникает необходимость в оценке способностей антител класса G взаимодействовать с ЦМВ, чтобы потом «обезвредить» его (авидность АТ). На начальном этапе болезни IgG очень плохо связываются с антигенами вируса (низкая авидность) и лишь потом начинают проявлять активность, стало быть, можно говорить о повышении авидности антител.

Алгоритм ИФА-исследований при подозрении на ЦМВ

Что такое паразиты – вряд ли стоит рассказывать, ведь они преследуют человека, начиная с детского возраста и, в полном смысле слова, отравляют ему жизнь (продукты жизнедеятельности паразитов очень ядовиты). Они бывают внушительных размеров (гельминты, а попросту – глисты) или маленькие (амебы, трихомонады, лямблии).



До появления в клинической лабораторной диагностике иммуноферментного метода найти паразитов было весьма сложно, теперь же, как говорят: «Нет проблем!». А все потому, что есть ИФА, который отыщет паразита, в какой бы форме тот не пребывал (цисты, личинки, яйца или взрослая особь) и в какой бы части человеческого тела не находился. Для этого нужно лишь взять кровь из вены и найти антитела, которыми организм уже ответил на чужеродные антигены.

О достоинствах иммуноферментного анализа можно говорить долго и много, ведь этот метод сумел решить многие диагностические задачи, используя лишь венозную кровь. Не нужно долгих ожиданий, волнений и проблем с забором материала для исследования. К тому же тест-системы для ИФА продолжают совершенствоваться и не за горами тот день, когда тест выдаст 100% достоверность результата.

Источник: http://izppp.ru/analizy/ifa/

Особенности проведения иммуноферментного анализа (ИФА)

Представляя собой современный вид лабораторного исследования, ИФА, или иммуноферментный анализ позволяет найти в крови специфические антитела либо антигены к определенным заболеваниям. Это позволяет обнаружить как этиологию болезни, так и определить ее стадию. При этом результаты подобного вида исследования могут выдаваться как количественно, так и качественно. Итак, давайте рассмотрим в подробностях принцип метода иммуноферментного анализа, его методику и суть.

Что такое иммуноферментный анализ

Назначаемый для максимально полной комплексной оценки состояния здоровья, иммуноферментный анализ позволяет оценить общее состояние здоровья и дать оценку его защитным функциям. Данное лабораторное исследование позволяет диагностировать инфекционные, аутоиммунные, гематологические патологии при анализе крови.



Суть иммуноферментного анализа рассмотрена в видео ниже:

Кому его назначают

Данное исследование может быть назначены тем больным, у которых выявляется наличие следующих заболеваний:

  • аллергические реакции;
  • болезни вирусного происхождения, к которым относятся гепатиты, вирус Эпштейн-Барр, герпес, цитомегаловирус;
  • заболевания, которые передаются половым путем — хламидиоз, трихомонада, сифилис, уреаплазма, микоплазма;
  • иммунодефицит;
  • нейросифилис;
  • онкологические патологии;
  • проведение предоперационного комплексного обследования.

Врачом может быть назначен данный анализ для установки стадии имеющегося заболевания, что позволяет своевременно вносить корректировки в применяемое лечение. А высокая точность получаемых данных позволяет иметь максимально развернутую картину здоровья. При этом получение данных после проведенного исследования происходит в очень короткий промежуток времени, что позволяет отслеживать динамику развития патологического процесса.

Зачем сдавать такие анализы

Поскольку благодаря ИФА анализу крови можно получить значительное количество информации о состоянии здоровья и патологических процессах, происходящих в организме, именно он дает возможность наиболее полно учитывать исходные данные (общее состояние здоровья, стадия заболевания, динамика развития патологического процесса, показатель эффективность применяемой терапии) при составлении схемы лечения.

По этой причине для получения наиболее выраженного результата лечения и быстрейшего прекращения патологического процесса в организме назначается ИФА анализ крови. Серьезные заболевания иммунной системы, наличие антигенов в крови и причины аллергии на основе полученных данных можно вылечить более быстро, применяя наиболее результативные методы.



Назначение ИФА анализа проводится при множестве патологий, и делать его следует только по назначению врача. Частота проведения анализа также устанавливается врачом, и при сдаче крови для проведения ИФА анализа картина болезни наиболее полная. Поскольку получение динамики течения болезни возможно при сдаче данного анализа более одного раза, наиболее часто может назначаться сдача крови от трех до пяти раз. Это дает возможность сравнить количество антител в крови в различные временные промежутки.

Виды такой процедуры

Существует несколько разновидностей иммуноферментного анализа. Различаются они видом взятой жидкости из организма человека, на основании которой проводится изучение ее состава и наличия определенных антигенов.

При этом для анализа может браться не только кровь человека, но и другие его жидкости:

  • околоплодные воды,
  • спинномозговая жидкость,
  • содержимое стекловидного тела,
  • мазки,
  • слизь из уретры и цервикального канала.

Проведение самой операции по взятию определенного вида жидкости стандартный и проводится в условиях дневного стационара.

Показания для проведения

Обычно ИФА анализ назначается врачом при необходимости получения развернутой картины текущего заболевания, проходящего в любой форме: хронической, вялотекущей либо острой. И показаниями к проведению данного вида анализа могут считаться следующие состояния и лечебные цели:

  • поиск антигенов определенных заболеваний;
  • определение гормонального статуса;
  • выявление в организме вируса гепатита;
  • исследование на наличие онкомаркеров;
  • поиск антител к любому виду инфекционного заболевания;
  • обследование на наличие аутоиммунных поражений организма.

Также иммуноферментный анализ назначается для выявления наличия поражения организма гельминтами и кишечными паразитами и имеющихся аллергических проявлений. При проведении выбранного метода лечения имеющегося заболевания этот анализ позволяет увидеть динамику процесса излечения, а также внести в него необходимые корректировки.



О проведении иммуноферментного анализа смотрите в видео ниже:

Противопоказания для проведения

Противопоказаний для иммуноферментного исследования на сегодняшний день не выявлено.

При беременности, когда наблюдается постоянное изменение содержания в крови гормонов, необходимо неоднократное проведение данного анализа для подтверждения полученного результата. Новорожденные и дети грудного возраста могут также иметь некорректные данные анализа: во время внутриутробного развития определенные виды антител могут проникать в кровь плода через плаценту матери. Потому их наличие во взятом анализе не следует считать признаком имеющейся инфекции.

Безопасность анализов

Проведение процедуры взятия любого вида жидкости из организма человека не приносит никакого отрицательного воздействия на организм. Полная стерильность при совершении манипуляций позволяет избежать вероятность заражения любыми видами заболеваний.

Подготовка к проведению

Для получения анализа может использоваться любой вид жидкости организма человека. Однако наиболее распространенным следует считать сыворотку крови. Кровь берется у пациента натощак, полностью исключается прием любого вида лекарств, поскольку они могут существенно влиять на общую картину результата. Прекращение приема специфического лечения, назначаемого при антибактериальном, противовирусном, противопаразитарном воздействии, осуществляется за недели перед проведением исследования.



Как проходит процедура, ощущения во время нее

Для проведения ИФА анализа кровь у пациента берется строго натощак: следует не принимать пищу в каком-либо виде не менее чем за часов до процедуры. Анализ берется из локтевой вены.

О наличии любых заболеваний и принимаемых лекарствах сообщается врачу заранее, наиболее часто препараты на момент сдачи крови будут отменены. Ощущения во время проведения процедуры сходны со взятием крови для проведения биохимического анализа.

Далее рассмотрена расшифровка результатов и указана норма рекции иммуноферментного анализа крови.

Расшифровка результатов

ИФА-диагностика позволяет определить наличие инфекции в организме, активность патологического процесса и этиологию имеющейся инфекции. Быстрое получение результата проведенного анализа (в течение суток) — одно из преимуществ данного вида исследования.

Процесс расшифровки полученной информации осуществляет врач. При этом следует учитывать, что корректность полученных результатов по динамике любых процессов гарантируется при прохождении анализов в одной лаборатории.



Далее будет рассмотрена цена на иммуноферментный анализ (метод ИФА) крови на паразитов и иные патологии.

Средняя стоимость процедуры

Средняя цена ИФА-исследования зависит от направленности анализа и определения конкретных величин. Так, определение серологических маркеров инфекционных заболеваний различных видов (anti-HAV IgG, anti-HAV IgM, HBsAg) будет стоить от 200 до 320 рублей и проводится в течение 2 рабочих дней. Показатель стоимости данной процедуры считается также его преимуществом: доступность цен на любые виды исследований позволяет проводить исследование при любом размере бюджета.

Стоимость ИФА-исследования зависит от политики медицинского учреждения, однако его следует считать общедоступной процедурой, позволяющей получить развернутую картину имеющегося заболевания и обеспечить максимально полное лечение.

Про нормы и особенности ИФА-исследования смотрите в видеоролике ниже:

Источник: http://gidmed.com/dermatologiya/diagnostika-derm/immunofermentnyj-analiz.html



Что такое ИФА анализ крови и почему это важно для диагностики

ИФА анализ крови, что это такое? Наверное, все помнят, что в ответ на проникновение вирусов для борьбы с ними организм начинает вырабатывать комплексы антител. Эти иммунологические соединения обладают способностью распознавать и уничтожать «свой» возбудитель. На этом и построено исследование, которое позволяет определить наличие и количество иммуноферментов, свойственное для определенного заболевания.

Немного общих сведений об анализе

ИФА, или иммуноферментный анализ крови, дает возможность определить специфические антитела (иммуноглобулины) к определенному виду возбудителя. Метод ИФА основан на следующем:

  • в ответ на внедрение микроорганизма иммунная система начинает вырабатывать антитела;
  • иммунокомплексы отличаются специфичностью и уничтожают только чужеродные клетки;
  • при добавлении в сыворотку крови больного экстракта возбудителей, если имеются антитела, образуется стандартное соединение: антитело-антиген, при этом происходит активное выделение ферментов.

О положительном или отрицательном тестировании в лаборатории судят по тому, произошла ли реакция в плазме после добавления к ней возбудителя, и насколько интенсивным был процесс.

Норма для здорового человека – это единичные иммунокомплексы или их отсутствие.

Анализ ИФА не указывает на какое-то определенное заболевание, он позволяет лишь предположить примерно тип возбудителя, вызвавшего появление иммунокомплексов и определить стадию воспалительного процесса. Это позволяет скорректировать дальнейшие методы диагностики.



Об иммуноглобулинах

Что такое иммуноглобулин, многим понятно: иммунный комплекс, образовавшийся в ответ на проникновение чужеродных клеток. Но какими они бывают?

ИФА метод позволяет выделить 5 разновидностей иммуноглобулинов:

Основными для диагностики считаются A, M и G (некоторые источники по диагностике указывают только три этих иммунных комплекса), поэтому стоит рассмотреть их особенности:

  • А – отвечает за защиту слизистых. При острых патологиях он появляется в крови спустя 14 дней после инфицирования, а иногда и позже и исчезает через 8 недель от начала проявления признаков болезни. Если иммунокомплекс IgA сохраняется дольше, то можно предположить переход заболевания в хроническую форму. Антивирус А указывает на поражение слизистой мочевого пузыря, кишечника или органов дыхания.
  • М – служит указателем острой фазы заболевания. Отмечается в плазме спустя 5 дней от момента проникновения инфекции (даже если нет выраженных признаков заболевания) и исчезает через 6 недель, если происходит разрешение острого процесса.
  • G – остаточная реакция и иммунокомплексы сохраняются длительное время (иногда на протяжении всей жизни) и предотвращает повторное инфицирование или возникновение рецидивов. На формировании антител G основан принцип вакцинации, когда при введении ослабленных микробов и вирусов у человека вырабатывается длительный иммунитет. Повышение G – показатель того, что возбудитель повторно проник в организм или обострилась хроническая инфекция.

Иммуноферментный анализ крови на E и D не входит в обязательную программу обследования. Он назначается в следующих случаях:

  • Е – когда предполагают, что патология вызвана паразитами;
  • D – если есть вероятность, что патология имеет системный характер или возникла по причине возникшего иммунодефицита.

Анализ крови методом ИФА дает возможность обнаружить специфические антитела к чужеродным агентам уже на ранних стадиях патологии. В основе тестирования лежит стандартная реакция антиген-антитело, позволяющая определить наличие антител к возбудителю заболевания.



Показания для лабораторной диагностики

Анализ крови на иммуноферментный анализ показано проводить при подозрении на возникновение следующих патологий:

  • онкология;
  • вирусные гепатиты (при всех типах вируса);
  • герпетические поражения слизистой или кожи;
  • некоторые инфекционные процессы (сальмонеллез, корь, энцефалит, дизентерия);

сифилис;

  • инфекции, передающиеся половым путем (гонорея, хламидиоз, микоплазмоз и др.);
  • атопические процессы (аллергии);
  • цитомегаловирус;
  • эндокринные сбои;
  • иммунодефицит;
  • бесплодие;
  • глистные инвазии.
  • Также ИФА анализ крови позволяет спрогнозировать течение некоторых неинфекционных заболеваний:

    Также с профилактической целью проводят ИФА во время медосмотров.

    ИФА диагностика позволяет выявить более 600 антител к инфекционным и неинфекционным антигенам, что делает исследование незаменимым при выявлении болезни на раннем этапе. Методика ИФА считается наиболее информативной при обследовании на ВИЧ и на онкологию.

    

    На чем основана методика

    Кажется, что иммуноглобулинов всего пять, а с их помощью определяется большое количество патологических процессов. Возможно ли такое?

    Возможно. Это происходит потому, что подсчет иммуноглобулиновых соединений делается по разным тестам:

    • антинуклеарные тела (указывают на аутоиммунные процессы);
    • ревматоидный фактор (выявляет ревматические поражения);
    • двуспиральные ДНК (выявляется группа белков, появляющихся при системных болезнях);
    • ENA скрин (определяет несколько видов антигенов, свойственных при ревмофакторе или при системных соединительнотканных поражениях);
    • антикардиолипиновые антитела (иммунокомплексы образуются при ВИЧ, эпилепсии и некоторых системных процессах);
    • ANGA скрин (соединения характерны для аутоиммунных процессов);
    • цитрулиновый пептид (антитела появляются при ревматоидном артрите);
    • С-реактивный белок (С-реактивный протеин свидетельствует о наличие острого или обострении хронического процесса);
    • иммунофлюоресцентный анализ (укажет на гормональный сбой или на наличие злокачественных новообразований).

    Расшифровка анализа проводится с учетом применяемых методик. Оценка полученных данных довольно сложная и проводится врачом, а для пациентов, желающих перед посещением доктора самостоятельно проанализировать полученные из лаборатории данные, можно предложить следующую таблицу:

    В таблице указаны лишь общие сведения. В анализе ИФА при расшифровке врачом учитывается не только наличие иммуноферментных соединений, но и их количество, а также методики, применяемые для проведения исследования.

    Преимущества метода

    ИФА анализатор довольно часто применяется при дифференциальной диагностике болезней и для контроля качества лечения. Методика имеет ряд преимуществ:

    
    • Дешевизна. Диагностические наборы стоят относительно недорого.
    • Простота. Нет необходимости в оснащении сложной аппаратурой, и исследование может быть проведено в любой лаборатории.
    • Высокая информативность. Достоверность определения вида антигена около 90 %.
    • Быстрота. Анализатор ИФА автоматизирован, в экстренной лаборатории данные исследования можно получить уже через несколько часов после сдачи биоматериала.
    • Ранняя диагностика. Иммуноглобулины появляются в крови на начальной стадии заболевания.
    • Длительность хранения. Взятый у пациента материал может сохраняться до года.
    • Стадия болезни. Соотношение и основные характеристики обнаруженных в плазме иммуноглобулинов дают возможность определить тяжесть течения и стадию заболевания.
    • Контроль динамики. При проведении лечения ИФА иммуноферментный анализ позволяет проводить коррекцию проводимой терапии в зависимости от лабораторных показателей.
    • Легкость забора биоматериала. Для диагностики достаточно небольшого количества венозной крови.

    Анализ крови ИФА высокоинформативен и позволяет выявить патологию на начальном этапе развития, но только на основании лабораторного исследования диагноз не ставится. Окончательная диагностика возможна лишь после полного обследования пациента.

    Недостатки методики

    Несмотря на ряд преимуществ, исследование крови методом иммуноферментации имеет некоторые недостатки:

    • невозможность со 100% точностью определить вид возбудителя (при некоторых заболеваниях вырабатываются похожие иммуноглобулины);
    • вероятность получения ложноположительного результата (бывает у беременных или при несоблюдении правил подготовки к анализу).

    На достоверность диагностики может повлиять следующее:

    • табакокурение и употребление спиртного;
    • нервное перенапряжение или стресс;
    • физические нагрузки;
    • прием некоторых лекарств (кровь сдавать можно только спустя 10 дней после отмены препаратов).

    Эти недостатки анализа крови на ИФА не мешают врачам признавать методику наиболее удобной и информативной для выявления болезней на ранних стадиях. При необходимости, для уточнения полученных из лаборатории данных, больным могут назначаться более специфические анализы, позволяющие вернее определить тип возбудителя.

    ИФА в паразитологии

    IgE свойственен глистным инвазиям, но может появляться в плазме и при некоторых аллергиях (находится в крови в небольшом количестве). Несмотря на вероятность получения ложноположительных реакций, кровь на ИФА часто назначается паразитологами для обнаружения следующих видов паразитов:

    Глистные инвазии, как и инфекционные возбудители, вызывают выработку антител Е. Рост в крови этого маркера почти всегда указывает на наличие в организме паразитов (при атопических реакциях он остается на прежнем уровне или незначительно повышается).

    Паразиты не обязательно располагаются на слизистой кишечника, они могут проникать в ткани почек, сердца и других органов. Если паразитирование в кишечнике легко выявляется наличием в исследуемом кале яиц, личинок или взрослых особей, то поражение других тканей определяется только при помощи иммуноферментной реакции.

    Теперь многим стало понятно, что такое ИФА и уже не пугает загадочное лабораторное сокращение. Действительно, исследование назначается не только для подтверждения заболеваний. Некоторые иммуноферментные тесты (сифилис, ВИЧ) входят в обязательную программу медицинского обследования, и получение отрицательного результата служит показателем здоровья. А если тестирование окажется положительным, то и это не повод для паники: чем раньше начнется лечение обнаруженной болезни, тем благоприятнее прогноз.

    Все права защищены. Копирование материалов с сайта возможно только с указанием активной ссылки.

    Статьи на сайте носят информационный характер, проводить лечение заболеваний может только квалифицированный врач.

    Источник: http://analiznorma.ru/analiz-krovi/ifa

    ИФА – что это такое, расшифровка результатов

    Анализ ИФА является современной методикой лабораторной диагностики значительного количества различных заболеваний. Аббревиатура расшифровывается как иммуноферментный анализ. Суть методики заключается в определении титра (активности) антител.

    Методика ИФА на сегодняшний день набирает значительную популярность. Она применяется в клинической медицине для диагностики различной патологии, а также в экспериментальных исследованиях, которые требуют точного определения концентрации различных соединений в исследуемых средах.

    Принцип методики ИФА

    Иммуноферментный анализ является иммунологической реакцией. Она основана на добавлении специфических антител или антигенов в исследуемую среду (чаще всего исследуемая кровь) с последующим ферментативным определением концентрации образовавшихся комплексов антиген-антитело. По концентрации комплекса можно судить об уровне или активности определяемого соединения в исследуемой среде.

    Определение концентрации комплексов антиген-антитело обычно осуществляется при помощи специальной аппаратуры хроматографическим методом.

    Показания к проведению

    ИФА анализ проводится по различным показаниям, основными из них в клинической медицине являются:

    • Диагностика инфекционной патологии с преимущественно половым путем передачи (ИППП), к которым относятся хламидиоз, микоплазмоз, уреаплазмоз, трихомониаз, при этом выявляются специфические антитела к возбудителю инфекции.
    • Диагностика инфекционных заболеваний различной локализации для определения стадии патологического процесса, в первую очередь в процессе диагностики парентеральных вирусных гепатитов и ВИЧ.
    • Определение концентрации гормонов для диагностики различной патологии органов эндокринной системы (железы внутренней секреции).
    • Определение различных соединений для диагностики причины интоксикации организма при отравлениях, укусах насекомых или змей.

    При этих медицинских показаниях выполняется анализ крови ИФА. Также данная методика активно применяется в экспериментальной медицине во время проведения различных клинических исследований во время разработки новых лекарственных средств, вакцин для иммунопрофилактики.

    Как проводится исследование

    Анализ крови методом ИФА проводится в условиях специализированной лаборатории. Предварительно для его проведения забирается венозная кровь, обычно из локтевой вены в объеме 5-10 мл, которая затем отправляется в лабораторию. В среднем результат анализа можно получить уже на следующий день, что является важным моментом для скорейшего назначения лечения после установления диагноза заболевания.

    Как подготовиться к ИФА

    Для получения достоверных результатов исследования методом иммуноферментного анализа следует придерживаться несколько несложных подготовительных рекомендаций, к которым относятся:

    • За день до сдачи анализа следует отказаться от употребления в пищу жирных продуктов питания (мясо, копчености) и алкоголя.
    • Материал для исследования необходимо сдавать утром натощак.
    • В день исследования желательно избегать физических и психоэмоциональных нагрузок.
    • Перед исследованием необходимо постараться не курить.

    Выполнение этих рекомендаций необходимо для исключения получения ложноположительного результата ИФА.

    Большинство полученных ложноположительных результатов иммуноферментного анализа крови бывает вследствие неправильного выполнения подготовительных рекомендаций. Это в большинстве случаев связано с употреблением в пищу жирных продуктов питания, которые приводят к увеличению концентрации триглицеридов (жиры) в плазме крови, которые снижают специфичность проводимого ИФА.

    Расшифровка результатов

    Анализ крови на антитела при помощи ИФА имеет 2 модификации – качественное и количественное определение. При качественном определении антител результат может быть положительным (антитела выявлены, что указывает на возможное наличие патологического процесса, вызванного возбудителем инфекции) или отрицательным (антител нет, что свидетельствует об отсутствии инфекционного процесса).

    Отсутствие антител не всегда является стопроцентным показателем отсутствия инфекционного процесса. Это связано с тем, что после заражения антитела образуются не сразу, а в течение определенного периода времени (минимум около 2-х недель). Поэтому для подтверждения отсутствия инфекции проведение ИФА может повторяться через некоторое время.

    При количественном ИФА выполняется определение титра (активности) антител, а также их классов. В большинстве случаев для диагностики инфекционных заболеваний проводится определение антител класса IgG (иммуноглобулины G) и IgM (иммуноглобулины М), которые образуются в организме через различные промежутки времени после инфицирования, поэтому расшифровка результата анализа может иметь несколько значений:

    • Повышение активности IgМ и отсутствие IgG – свидетельство недавнего инфицирования и острого течения инфекционного процесса.
    • Повышение активности IgМ и IgG – обострение инфекционного процесса при его хроническом течении и давнем заражении.
    • Высокая активность IgG и отсутствие IgМ – хроническое течение инфекционного процесса на фоне давнего заражения, после которого прошло более полугода (время, необходимое для образования антител класса IgG).

    В целом расшифровка результатов ИФА для каждого инфекционного процесса имеет определенные особенности. Более точное определение наличия инфекционного заболевания, а также стадии его течения проводит врач.

    ИФА на сегодняшний день является методом выбора диагностики большинства инфекционных заболеваний. На основании результатов такого исследования врач имеет возможность установить точный диагноз и определить стадию течения патологического процесса для назначения последующего адекватного и эффективного лечения.

    Все материалы сайта являются ознакомительными, они не призывают к самолечению. В случае появления каких-либо симптомов, необходимо обращаться к врачу.

    Источник: http://prof-med.info/laboratornye-issledovaniya/113-ifa

    Иммуноферментный анализ крови

    Иммуноферментный анализ крови – это высокоэффективная и современная методика клинической диагностики целого ряда заболеваний. Суть данной методики состоит в выявлении активности определенных антител. ИФА крови используется не только лишь для определения существующих патологий человеческого организма, а и в ходе экспериментальных исследований, где требуется особая точность определения процентных концентраций соединений в биологическом материале.

    Принцип диагностики

    Иммуноферментный анализ — это выявление специфических антител посредством биохимических реакций. Если человек заболевает, и в его организм попадает чужеродный агент (антиген), то иммунная система начинает активно вырабатывать особые белки или антитела, которые уничтожают антигены. В результате их «столкновения» образуются соединения антиген-антитело.

    Именно на их количественный и качественный анализ направлены иммуноферментные исследования. К примеру, если в процессе диагностики нужно выявить конкретный вирус в биоматериале крови пациента, то в нее добавляют антитела, которые считаются специфическими к вирусу.

    И наоборот, ИФА реакция на выявление антител заключается во введении в образцы крови определенных антигенов. Особые реагенты ИФА используются в диагностике для того, чтобы сделать биохимическую реакцию более четкой.

    Человеческому организму также свойственны неспецифические факторы защиты. Неспецифические антитела — это белки, которые действуют губительно на большое количество вредоносных микроорганизмов. Их не используют при проведении ИФА.

    Показания к проведению

    ИФА исследование проводят по рекомендации врачей в следующих случаях:

    • Определение патологий инфекционного характера, которые попадают в организм пациента преимущественно половым путем. Точная диагностика инфекций типа уреаплазмоза, трихомониаза или микоплазмоза.
    • Анализ на гормоны в сыворотке крови. Чаще всего анализы определяют тестостерон, прогестерон, тиреотропный гормон, пролактин. Это также относится к диагностике заболеваний органов эндокринной системы.
    • Выявление маркеров онкологического типа.
    • Идентификация различных соединений и установление причины интоксикации человека при укусах змей или отравлениях.
    • Диагностика инфекционных болезней, локализованных в разных органах и системах организма, установление тяжести и стадии патологического процесса. Анализ ИФА определяет такие заболевания, как ВИЧ, вирусные гепатиты всех групп, корь, краснуху, хеликобактерную инфекцию.

    Варианты проведения

    В современной медицине иммуноферментное исследование применяют в двух вариантах: твердофазном и гистохимическом. Последний вариант используют в диагностике крайне редко. Материалом для исследования в этом случае может быть мазок ИФА, группы клеток, срезы парафиновые или отпечаток диагностируемых органов.

    Твердофазный ИФА – это метод анализа, при котором один из участвующих в реакции компонентов (либо антитело, либо антиген) фиксируется на специальном твердом носителе. Это могут быть шарики, микропанели или палочки из полистирола. Данный иммунохимический метод — это гарантия идентификации и обнаружения антигена. Во время диагностики также можно будет выявить характерные антитела и выделить их титр в кровяной сыворотке.

    Существует прямой и непрямой способ твердофазного исследования. Для выявления антигенов в лаборатории используют прямой метод, который также имеет название сэндвич метод. Для его осуществления берутся антитела, специфические к выявляемому антигену. Их помещают в лунки микропанели, куда позже вносится и сам антиген. Содержимое нагревают до 37 °С и выдерживают определенное время до самого введения помеченных ферментом антител.

    Добавление раствора серной кислоты вызывает химическую реакцию. При положительном результате образцы окрасятся в оранжевый или желтый цвет. Анализ на наличие антител и определение их титра выполняют непрямым твердофазным ИФА.

    Виды иммуноглобулинов, которые определяет анализ

    Классификация состоит из 5 основных типов иммуноглобулинов человека: IgA, IgG, IgE, IgM и IgD. Для медицины большое практическое значение имеют лишь несколько из них (А, G, М).Иммуноглобулин класса А (или IgA) выполняет функцию защиты от инфекций слизистых, желудочно-кишечного аппарата, мочевыделительной системы и органов дыхания. В начале недуга выявить данные иммунные комплексы не представляется возможным, они проявляют себя только на 2 неделе заболевания или позже.

    Иммуноглобулины IgM характеризуют острую фазу патологического процесса в организме. Их можно идентифицировать в крови уже на 5 сутки болезни. Анализ ИФА при беременности в некоторых случаях выдает завышенный показатель IgM, что не всегда является показателем инфицирования.

    Иммуноглобулины класса G (или IgG) выявляют остаточный иммунный процесс. Первое их появление в образце крови приходится на 5-6 неделю болезни. Потом IgG могут присутствовать в течение всей жизни пациента, защищая его от рецидива заболевания и даже полностью исключая вторичное развитие патологий. При выявлении маркеров иммунной системы и аутоиммунных патологических процессах показатели IgG отличаются по своей природе. Например, Igg от Igg4 отличается тем, что первый иммуноглобулин общий, а второй – секреторный.IgE используют только в исследованиях паразитологии.

    Иммуноглобулин IgD локализуется в лимфоцитах. В небольшой концентрации его можно обнаружить в крови каждого здорового человека. Количество этого компонента резко возрастает во время вынашивания ребенка, поэтому анализ на ИФА при беременности имеет некоторые отклонения. IgD повышен у больных астмой и людей с иммунодефицитом.

    Проведение диагностики

    Материалом для проведения ИФА служит венозная кровь, которая забирается из локтевой вены пациента. Рекомендуемый объем – 5-10 мл. Как только материал будет взят, его отправляют в диагностическую лабораторию.

    Если все правила были соблюдены, то результат предоставят уже на следующий день.

    Чтобы результат ИФА был достоверным, врачи настоятельно рекомендуют выполнить следующие правила подготовки:

    1. сдавать анализ на ИФА разрешается только натощак.
    2. последний прием пищи должен произойти за несколько часов до сна (исключить стоит жирные, копченые и мясные продукты).
    3. за несколько суток до визита в лабораторию нужно отказаться от приема препаратов.
    4. перед процедурой нельзя курить или употреблять любой алкоголь.
    5. запрещается накануне сдачи крови изнурять организм физическими нагрузками.

    Расшифровка результатов качественного ИФА-метода

    В ответе на ИФА по качественному методу возможны два вида результата:

    • отрицательный значит, что антител в собранной порции крови не обнаружено (отсутствие инфекционного процесса);
    • положительный – свидетельствует о выявлении антител (есть высокая вероятность патологического заболевания, вызванного инфекционным возбудителем).
    Если изучение образца показало отрицательное значение иммуноглобулинов групп М, G и А, то можно сказать либо об отсутствии недуга, либо о начальной стадии его развития. Такой же результат бывает у пациентов при окончательном выздоровлении, когда прошло уже достаточно большое количество времени.

    Повышенный положительный титр IgM при значениях IgA и IgG со знаком «-» свидетельствует о протекании в организме пациента острой фазы инфекционного недуга.Если результат показал положительные значения всех трех видов иммуноглобулина (М, G и А), то это говорит о рецидиве инфекционного недуга, которое находится в острой или хронической фазе развития.

    Расшифровка результатов количественного ИФА-метода

    Количественный метод определяет концентрации искомых веществ в образце крови. Полученный результат может выражаться в следующих единицах измерения:

    1. ОП – единицы измерения оптической плотности характеризуют уровень концентрации антител в единице объема. Чем она выше, тем больше иммуноглобулинов в биоматериале.
    2. Некоторые из применяемых ИФА-методик предполагают наличие такого показателя как индекс позитивности в анализе. Коэффициент позитивности — это обозначение, аналогичное плотности образца.
    3. Параметры концентрации антител выражаются в миллилитрах, нанограммах (или нг/мл).
    4. В виде присутствующих символов: «-», «+», «?» (+, ++, +++ и более).

    Не стоит забывать, что достоверно оценить количество найденных иммуноглобулинов и поставить окончательный диагноз может только опытный врач.Каждая тест-система имеет свои референтные значения. Варианты нормы и варианты патологических отклонений у них различные.

    Преимущества метода

    • Удобство и быстрота проведения биохимических реакций для диагностики;
    • Высокий уровень точности и чувствительность метода (составляет не менее 90%);
    • Возможность проведения диагностики даже на самой ранней стадии развития патологических процессов;
    • Уровень стоимости процедуры диагностики делает ее доступной для населения;
    • Возможность отслеживания динамики инфекционного процесса;
    • Абсолютная безопасность и относительная безболезненность;
    • Для получения достоверного результата хватает и минимального объема материала для исследования;
    • Бланк с ответом будет получен в кратчайшие сроки;
    • Существует возможность частичной или полной автоматизации процесса (полный цикл ИФА проводит анализатор лазурит).

    Единственным недостатком считается то, что ИФА относится к непрямым видам диагностики.

    То есть, дает возможность определить только иммунный ответ человеческого организма на наличие возбудителя, а не самого возбудителя.

    Источник: http://brulant.ru/health/ifa-issledovanie/

    admin
    admin

    ×